Int J Nanomedicine：预处理禽源间充质干细胞小囊泡，为卵巢早衰及激素下降提供新型纳米治疗方案

Int J Nanomedicine：预处理禽源间充质干细胞小囊泡，为卵巢早衰及激素下降提供新型纳米治疗方案

来源：100医药网 2025-09-22 17:04

对于女性而言，卵巢功能健康直接关系到生育能力与内分泌平衡，而卵巢早衰（POI）却成为困扰不少女性的难题。POI常以颗粒细胞功能异常、类固醇生成减少、雌激素水平低下为特征，化疗是其常见诱因之一。尽管再生医学不断发展，但针对POI的无细胞纳米治疗方案仍有待深入探索。

近日，Int J Nanomedicine发表的一项研究Primed Extracellular Vesicles as a Nanotherapeutic Strategy to Enhance Granulosa Cell Function in a Model of Premature Ovarian Insufficiency and Hormonal Decline，聚焦 预处理禽源间充质衍生小细胞外囊泡（primed AMSC-sEVs） ，探究其在（CTX）诱导的颗粒细胞损伤模型（模拟POI相关激素功能异常）中的治疗效果，为POI治疗带来新突破。

研究首先对primed AMSC-sEVs的理化特性进行分析，结果显示，与未处理的AMSC-sEVs（naive AMSC-sEVs）相比，primed AMSC-sEVs粒径更小且分布更均一，颗粒浓度显著提高，zeta电位负值更大（平均-24.4 mV vs naive组的-13.3 mV），这意味着其胶体稳定性更优，为后续发挥生物功能奠定基础。在体外实验中，primed AMSC-sEVs可剂量依赖性促进人颗粒细胞（hGCs）增殖，且在相同颗粒浓度下，其促增殖效果显著优于naive AMSC-sEVs，展现出更强的生物活性。

图1 未处理与预处理禽源间充质干细胞小囊泡的表征及功能分析

为模拟POI病理状态，研究用不同浓度CTX处理hGCs，结果显示CTX会剂量依赖性降低hGCs活力（p 0.001），同时显著抑制卵巢功能相关基因AMH、FSHR、LHCGR的表达（p 0.001），成功构建体外POI模型。

图2 环磷酰胺诱导的体外卵巢早衰模型

在此模型基础上，研究进一步验证primed AMSC-sEVs的治疗作用。用2 M CTX损伤hGCs后，再加入primed AMSC-sEVs处理，结果发现，primed AMSC-sEVs（1 10⁸ particles/mL）不仅能显著提升hGCs活力，还能有效改善CTX导致的细胞活力下降（p 0.001）；同时，它可显著降低CTX诱导的hGCs凋亡率，且呈剂量依赖性，其抗凋亡效果在相同浓度下优于naive AMSC-sEVs（p 0.001）。

图3 预处理禽源间充质干细胞小囊泡改善环磷酰胺诱导的体外卵巢早衰模型

在细胞功能恢复方面，CTX会显著下调hGCs中AMH、FSHR、LHCGR的表达，而primed AMSC-sEVs（1 10⁸ particles/mL）可显著上调这三种基因的表达，且能恢复CTX降低的基因水平，甚至使其表达超过正常对照组（p 0.001）；对于增殖相关基因PCNA和凋亡相关基因（TP53、CASP3、BCL-2），primed AMSC-sEVs可剂量依赖性上调PCNA和抗凋亡基因BCL-2的表达，下调促凋亡基因TP53和CASP3的表达，同时恢复CTX对这些基因的调控异常（p 0.001），而naive AMSC-sEVs仅能恢复部分基因水平，无法实现上调作用。

图4 预处理禽源间充质干细胞小囊泡增强环磷酰胺损伤人颗粒细胞的细胞活性

蛋白水平检测进一步证实，CTX会增加hGCs中cleaved Caspase-3、cleaved Caspase-9、BAX、cleaved PARP等促凋亡蛋白的表达，降低抗凋亡蛋白BCL-2的表达；而primed AMSC-sEVs处理后，促凋亡蛋白表达显著降低，BCL-2表达显著升高，且对Caspase-9的抑制效果优于naive AMSC-sEVs（p 0.001），同时Caspase-8表达无变化，提示其主要通过内源性凋亡通路发挥抗凋亡作用。

图5 预处理禽源间充质干细胞小囊泡抑制环磷酰胺处理人颗粒细胞的凋亡

在类固醇生成功能上，CTX会显著降低hGCs分泌雌二醇（E2）和孕酮（P4）的水平（p 0.001），而primed AMSC-sEVs不仅能剂量依赖性促进正常hGCs分泌E2和P4（p 0.05或p 0.001），还能有效恢复CTX降低的激素分泌水平（p 0.001），naive AMSC-sEVs则仅能恢复激素水平，无促分泌作用。此外，测序与qRT-PCR结果显示，primed AMSC-sEVs中富集多种调控类固醇生成和凋亡的关键miRNA，如miR-21-5p、miR-22-3p、miR-23b-3p、miR-199a-5p等，这些miRNA的高表达可能是其发挥治疗作用的重要分子机制。

图6 预处理禽源间充质干细胞小囊泡刺激并恢复环磷酰胺降低的人颗粒细胞类固醇生成

这项研究表明，primed AMSC-sEVs通过优化理化特性、富集关键miRNA，在改善POI样颗粒细胞损伤中展现出显著优势，既能增强颗粒细胞增殖能力、抑制凋亡，又能恢复卵巢功能相关基因表达和类固醇激素分泌，为POI治疗提供了新型纳米治疗策略。对于受POI或激素缺乏（如早期卵巢功能不全、更年期泌尿生殖综合征）困扰的女性，这一研究成果不仅为生育保护带来新希望，也为内分泌平衡调节提供了潜在的治疗方向，推动无细胞纳米疗法在生殖健康领域的进一步发展。（100yiyao.com）

参考文献：

Shieh JS, Chin YT, Guo JJ, et al. Primed Extracellular Vesicles as a Nanotherapeutic Strategy to Enhance Granulosa Cell Function in a Model of Premature Ovarian Insufficiency and Hormonal Decline.Int J Nanomedicine. 2025;20:11099-11117. Published 2025 Sep 11. doi:10.2147/IJN.S533393